
文库精确定量对于二代测序的结果是非常重要的。过低估计文库浓度,会导致簇生成过多,数据质量差;过高估计文库浓度,则导致数据产出量少,基因组覆盖率低。所以低估或者高估文库浓度都会影响测序结果。qPCR是文库定量的金标准,能够准确检测出文库的分子数。因为只有两端都连接有接头的文库片段才会被扩增,进而精准定量。无接头连接或仅有一端接头连接的片段无法进行扩增,这些片段不会被定量;而其他方法的定量,如Qubit,Nanodrop等方法会把所有的片段都进行定量,导致定量结果的偏差。 该试剂盒包含了文库定量所需的qPCR mix、引物对及6个浓度的标准品。